宏基因组测序
►【服务介绍】
宏基因组测序,是对特定环境样品中的微生物群落基因组进行高通量测序,以分析微生物群体基因组成及功能,解读微生物群体的多样性与丰度,探求微生物与环境、微生物与宿主之间的关系,发掘和研究新的、具有特定功能的基因。基于高通量测序的宏基因组学研究具有以下优势:1)很多自然界中的微生物并不能在实验室条件下进行培养,因此,无需进行分离培养而扩展了微生物的研究范围;2)该方法对环境中微生物群落的多样性、功能基因等宏观特征进行了研究,更快更有效、准确的反应出微生物真实状态;3)无需基因组片段在宿主菌中的富集,高通量测序能分析挖掘总体微生物中的物种种类以及功能基因,提高了宏基因组学在多种研究领域的广泛应用。
►【技术路线】
►【生物信息学分析】
宏基因组细菌多样性测序分析内容
总体数据统计分析
单个样品中微生物种类及丰度分析,序列聚类OTU,群落结构分析
多个样品间比较分析,包括相似度比对,OTU比较、多样品群落结构分析,PCA(主成分)分析
宏基因组学分析内容
将reads与已测序微生物基因组(或参考序列)进行比对,得到物种分类信息以及每个物种上的reads个数统计
对reads组装,得到contigs序列,根据contig的拼接结果,进行基因预测、基因功能注释、COG分类、GO分类、KEGG-KO分类及KEGG-map代谢图
►【应用领域】
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环境微生物:土壤、水体、污泥等
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动物微生物:生殖道、皮肤
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人体微生物:生殖道、皮肤
►【样品要求】
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样品总量:环境细菌多样性分类一次文库制备所需要的样品量为1 μg DNA,宏基因组测序一次文库制备所需要的样品量为 3 μg DNA,为保证实验的质量及延续性,请一次性提供至少两次的制备量(注:不同环境DNA质量差别较大,具体样品量请咨询当地技术人员);
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样品浓度和纯度:环境样品浓度 > 50 ng/μl,宏基因组为30 ng/μl,OD260/280 应在1.8-2.0之间,无蛋白质、RNA或肉眼可见杂质污染;
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样品质量:基因组完整、无降解,电泳结果基因组DNA主带在预期位置,清晰,无弥散;cDNA片段化样品,片段大小符合预期位置;
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样品保存:请选择干粉、酒精、TE buffer或超纯水一种,并在样品信息单中注明;
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样品运输:请将样品置于1.5 ml管中,做好标记,并用封口膜好,并同《测序样品订单》一起放在塑料样品袋封口,基因组DNA如果用乙醇沉淀,可以常温运输。
►【实验周期】
接收客户样品后,从质检合格到生物信息分析结束一般控制在30-45个工作日,但根据项目样品数量,完成周期有所调整。
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