转录组测序(编码蛋白质的RNA和长链非编码RNA测序)
►【服务介绍】
转录组,广义上指在相同环境(或生理条件)下的一个细胞、组织或生物体中出现的所有RNA的总和,包括信使RNA(mRNA)、核糖体RNA(rRNA)、转运RNA(tRNA)及非编码RNA;狭义上则指细胞所能转录出的所有mRNA。转录组测序是研究细胞表型和功能的一个重要手段,可以在细胞或组织水平上对整个转录组的时空表达进行分析。利用高通量测序技术进行转录组测序是一种跨界、可靠、有效的获得转录组信息的手段。相对于传统的芯片杂交平台,转录组测序无需预先针对已知序列设计探针,即可对任意物种的整体转录活动进行检测,提供更精确的定量信息,更高的检测通量以及更广泛的检测范围,是目前深入研究转录组复杂性的强大工具。通过对转录本表达分析可以快速发现新基因,并对SNP和lnDel变异、可变剪切、融合基因进行鉴定分析。
►【技术流程】
►【实验周期】
产品 |
策略 |
推荐数据量 |
周期 |
真核有参转录组 |
HiseqPE150 |
6 Gb、8 Gb、10 Gb、12 Gb clean data |
40天 |
真核无参转录组 |
无参拼接至少8 Gb clean data |
50天 |
|
表达谱 |
HiseqPE150/50SE |
3 Gb clean data/10M |
40天 |
►【样品要求】
-
转录组样品:RNA样品总量: ≥ 1.0 μg,RNA样品浓度: ≥ 50 ng/μl;
-
样品浓度和纯度:样品浓度 > 100 ng/μl,OD260/280 介于1.8-2.0之间,无肉眼可见污染;
-
样品质量:使用Agilent Bioanalyzer 仪器检测,则获得的总的RNA 28S:18S > 1,RIN 动物 > 7,RIN植物 > 6.5;
-
样品选择:对于细菌和真菌样品,希望尽量来自于同一个菌株,不要有宿主DNA污染;
-
样品保存:请选择乙醇、DEPC水保存样品,并在样品信息单中注明;
-
样品运输:样品请置于1.5 ml管中,并使用封口膜封好后干冰运输,请勿反复冻融。
官方微信